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编辑出版:
《上海医学》编辑部
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邮箱:
smasmj@shsma.org.cn
ISSN:
ISSN0253-9934
CN:
CN31-1366/R
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2012年第2期
TRIM21促进T细胞凋亡的分子机制与临床应用价值分析
The molecular mechanisms underlying TRIM21-induced T cell apoptosis and its clinical significance
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DOI:
作者:
谢军, 万小健, 卞金俊
Jun Xie1,Xiaojian Wan2, Jinjun Bian2.
作者单位:
1.江苏省盱眙县人民医院检验科,江苏盱眙,211700 2.上海第二军医大学附属长海医院麻醉科,上海,200433
1.Department of Clinical Laboratory, Hospital of Xuyu, Jiangsu, 211700; 2.Department of anesthesiology, Changhai Hospital, The Second Military Medical University, Shanghai, 200433
关键词:
T细胞凋亡;TRIM21;c-FLIP
T cell apoptosis; TRIM21; c-FLIP
摘要:
目的 研究E3连接酶TRIM21在anti-Fas诱导的T细胞凋亡中的作用及其分子机制,为评价TRIM21在临床上应用奠定基础。方法 构建TRIM21真核表达载体,设计TRIM21干扰片段,分别将它们过度表达于Jurkat细胞中。流式细胞仪分选阳性细胞,并采用Annexin V/PI 双染法测定Jurkat细胞凋亡率。采用蛋白质免疫印迹法与实时定量PCR法考察TRIM21过度表达对抗凋亡蛋白c-FLIP的蛋白质与mRNA水平的表达。结果 Jurkat细胞中过度表达TRIM21增强对anti-Fas诱导的细胞凋亡敏感性,且该敏感性提高与TRIM21从转录水平抑制c-FLIP表达相关。结论 TRIM21能抑制抗凋亡蛋白c-FLIP的表达,增强T细胞对Fas诱导细胞凋亡的敏感性。
Objective To investigate the effect of E3 ligase TRIM21 on anti-Fas induced T cell apoptosis as well as its molecular mechanism. Methods Transfect TRIM21 expression plasmid, or siRNA oligos into Jurkat cells, sort the cells with TRIM21 overexpression by flow cytometry, and measure the cell apoptosis by Annexin V/PI double staining method. Measure the protein as well as mRNA level of c-FLIP in TRIM21-overexpressing Jurkat cells by protein immunoblotting or real-time PCR assay. Results The overexpression of TRIM21 enhanced the apoptotic sensitivity of Jurkat cells towards anti-Fas induced apoptosis, furthermore, this increase in apoptotic sensitivity by TRIM21 is relevant to downregulation of c-FLIP. Conclusion TRIM21 inhibits the c-FLIP expression, thereby increasing T cells apoptosis sensitivity towards Fas.